Verbindingsonderzoek
TB-500: onderzoeksoverzicht
TB-500 is een peptideformulering waarin met massaspectrometrie Ac-LKKTETQ werd geïdentificeerd, het N-terminaal geacetyleerde fragment 17–23 van humaan thymosine bèta-4; deze sequentie komt overeen met het centrale actinebindende domein van het eiwit. In de vermelde referenties is TB-500 zelf onderzocht in analytisch onderzoek, metabolismeonderzoek en in-vitro-onderzoek met fibroblasten, terwijl het cel- en dieronderzoek naar actinebinding, celmigratie en wond- en hartmodellen voornamelijk betrekking heeft op het volledige thymosine bèta-4.1–6
Werkingsmechanisme in het kort
- G-actine (actinebindend domein)Thymosine bèta-4 wordt beschreven als het belangrijkste G-actine-sequestrerende molecuul in eukaryote cellen; LKKTETQ komt overeen met het centrale actinebindende domein ervan.2–4
- Celmigratie en angiogeneseEen overzichtsartikel uit 2010 bracht de sequentie die LKKTETQ bevat in verband met angiogenese, wondherstel en celmigratie in onderzoek naar thymosine bèta-4.2, 3
- ILK–PINCH–Akt-signaleringIn studies met hartcellen is gerapporteerd dat het volledige thymosine bèta-4 een complex vormt met PINCH en integrinegekoppeld kinase en Akt activeert.2, 4
- Metabolieten (bijv. Ac-LKKTE)Er is gerapporteerd dat TB-500 wordt gemetaboliseerd tot kortere geacetyleerde fragmenten; van de geteste moederverbinding en metabolieten werd alleen voor Ac-LKKTE activiteit gerapporteerd in een wondhersteltest met fibroblasten.5
Een overzichtsartikel uit 2010 bracht migratiegerelateerde activiteiten in verband met de actinebindende sequentie, maar had de activering van ILK–PINCH–Akt nog aan geen enkel gebied van thymosine bèta-4 toegeschreven. Of het fragment of de metabolieten ervan verantwoordelijk zijn voor de activiteit die voor TB-500 is gerapporteerd, wordt nog onderzocht.2, 5
Wat het is
TB-500 is een peptideformulering. Analytisch onderzoek met vloeistofchromatografie en hogeresolutiemassaspectrometrie identificeerde in TB-500 Ac-LKKTETQ, het N-terminaal geacetyleerde fragment 17–23 van humaan thymosine bèta-4. In dezelfde studie werd Ac-LKKTETQ bereid via vastefasepeptidesynthese. Latere publicaties beschrijven TB-500 als Ac-LKKTETQ. Thymosine bèta-4 zelf is een klein, alomtegenwoordig eiwit van 43 aminozuren. De LKKTETQ-sequentie komt overeen met het centrale actinebindende domein ervan.1–3, 5
Hoe het werkt
Thymosine bèta-4 bindt monomeer (G-)actine en wordt beschreven als het belangrijkste actinesequestrerende molecuul in eukaryote cellen. Een overzichtsartikel uit 2010 wees verschillende activiteiten van het eiwit toe aan korte sequenties daarbinnen. Het gebied dat LKKTETQ bevat, werd in verband gebracht met angiogenese, wondherstel en celmigratie. Een afzonderlijke N-terminale sequentie, Ac-SDKP, werd in verband gebracht met ontstekingsremmende en antifibrotische activiteit. Andere activiteiten, waaronder activering van ILK–PINCH–Akt-signalering, waren ten tijde van dat overzichtsartikel nog niet aan een specifiek gebied toegeschreven.2, 4
Hartmodellen (volledig eiwit)
Er is gerapporteerd dat thymosine bèta-4 de migratie bevorderde van myocard- en endotheelcellen in het embryonale hart en van postnatale cardiomyocyten. Daarnaast is gerapporteerd dat het de overleving van gekweekte embryonale en postnatale cardiomyocyten verbeterde. Het vormde een complex met PINCH en integrinegekoppeld kinase, wat leidde tot activering van het kinase Akt. Cardiale eindpunten werden ook onderzocht in een muismodel met ligatie van de kransslagader. Deze studies gebruikten het volledige eiwit, niet het fragment.4
Metabolisme
Het metabolisme van TB-500 werd onderzocht in humaan serum, in-vitro-enzymsystemen en urinemonsters van ratten. Er is gerapporteerd dat het wordt omgezet in kortere geacetyleerde fragmenten, met Ac-LK als primaire metaboliet bij ratten. De auteurs suggereerden dat de eerder voor TB-500 gerapporteerde wondherstellende activiteit mogelijk toe te schrijven is aan de metaboliet Ac-LKKTE en niet aan het oorspronkelijke peptide.5
Stand van het onderzoek
In de vermelde referenties hadden de wond- en hartstudies voornamelijk betrekking op het volledige thymosine bèta-4. Het onderzoek naar TB-500 zelf is analytisch, in vitro of bij ratten uitgevoerd.1, 3–5
Diermodellen
In dermale wondmodellen werd het volledige thymosine bèta-4 onderzocht bij diabetische db/db-muizen, oude muizen en ratten. Een synthetisch LKKTETQ-peptide, de niet-geacetyleerde sequentie, werd alleen bij oude muizen ernaast onderzocht. Het metabolisme van TB-500 is bij ratten onderzocht.3, 5
In-vitrostudies
Ac-LKKTETQ werd met vloeistofchromatografie en massaspectrometrie aangetoond in een TB-500-product. TB-500 en de metabolieten ervan werden in fibroblasten gescreend op cytotoxiciteit en wondherstellende activiteit.1, 5
Onderzoek bij mensen
Geen van de vermelde referenties rapporteert een klinische studie met TB-500. De hier aangehaalde literatuur met betrekking tot mensen betreft dopingcontrole, waaronder analytische benaderingen voor detectie in bloed-, plasma- en urinemonsters.1, 6
Gepubliceerd onderzoek in het kort
- Overzichtsartikel
Biologische activiteiten van thymosine bèta-4, toegeschreven aan korte actieve sequenties, waaronder LKKTETQ en Ac-SDKP
- Diermodel
Dermaal wondherstel met thymosine bèta-4 bij diabetische db/db-muizen, oude muizen en ratten, en met een synthetisch LKKTETQ-peptide bij oude muizen
- Diermodel
Migratie en overleving van hartcellen, ILK–Akt-signalering en een muismodel met ligatie van de kransslagader (volledig thymosine bèta-4)
- In vitro
Analytische identificatie van Ac-LKKTETQ in TB-500, de vastefasesynthese ervan en een voorgestelde detectiebenadering voor plasma en urine
- In vitro
Metabolisme van TB-500 in humaan serum, enzymsystemen en ratten, met screening van metabolieten op cytotoxiciteit en wondherstellende activiteit in fibroblasten
- Overzichtsartikel
Analytische detectie van opkomende en niet-goedgekeurde geneesmiddelen, waaronder TB-500, bij dopingcontroles bij mensen
Stand van het onderzoek: TB-500 werd in een overzichtsartikel over dopingcontrole uit 2014 genoemd onder de stoffen die volgens de regels van het Wereldantidopingagentschap (WADA) als dopingmiddel zijn ingedeeld, en een analytische studie uit 2012 beschreef het als een middel waarvan vermoed werd dat het als dopingmiddel in de sport werd gebruikt.1, 6
Technische specificaties
- Molecuulformule
- C212H350N56O78S
- Molecuulmassa
- 4963 Da
- CAS-nummer
- 77591-33-4
Referenties
- Esposito S, Deventer K, Goeman J, et al. Synthesis and characterization of the N-terminal acetylated 17-23 fragment of thymosin beta 4 identified in TB-500, a product suspected to possess doping potential. Drug Testing and Analysis (2012). doi:10.1002/dta.1402
- Sosne G, Qiu P, Goldstein AL, Wheater M. Biological activities of thymosin beta4 defined by active sites in short peptide sequences. FASEB Journal (2010). doi:10.1096/fj.09-142307
- Philp D, Badamchian M, Scheremeta B, et al. Thymosin beta 4 and a synthetic peptide containing its actin-binding domain promote dermal wound repair in db/db diabetic mice and in aged mice. Wound Repair and Regeneration (2003). doi:10.1046/j.1524-475x.2003.11105.x
- Bock-Marquette I, Saxena A, White MD, et al. Thymosin beta4 activates integrin-linked kinase and promotes cardiac cell migration, survival and cardiac repair. Nature (2004). doi:10.1038/nature03000
- Rahaman KA, Muresan AR, Min H, et al. Simultaneous quantification of TB-500 and its metabolites in in-vitro experiments and rats by UHPLC-Q-Exactive orbitrap MS/MS and their screening by wound healing activities in-vitro. Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences (2024). doi:10.1016/j.jchromb.2024.124033
- Thevis M, Schänzer W. Analytical approaches for the detection of emerging therapeutics and non-approved drugs in human doping controls. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis (2014). doi:10.1016/j.jpba.2014.05.020
Literatuuroverzicht opgesteld op 15 oktober 2026.